大容量人源单链抗体库构建中轻链重链可变区的连接
发表时间：2019-03-10
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- 论文类型：
- 期刊论文
- 第一作者：
- 张志超
- 合写作者：
- 胡学军,包永明,安利佳
- 发表时间：
- 2001-11-25
- 发表刊物：
- 免疫学杂志
- 收录刊物：
- PKU、CSCD
- 文献类型：
- J
- 卷号：
- 17
- 期号：
- 6
- 页面范围：
- 472-474
- ISSN号：
- 1000-8861
- 关键字：
- 单链抗体;抗体库;不对称PCR;多样性
- 摘要：
- 目的单链抗体库的构建过程中,多采用轻链可变区(VL)、重链可变区(VH)、和linker 3条片段重叠延伸拼接法(SOE)进行连接.为了优化抗体库的多样性,提高效率,探讨了新的连接方法.方法通过不对称PCR制备单链DNA,再俩俩连接,得到单链抗体(ScFv)基因.分别将SOE法及不对称PCR法连接得到的ScFv基因与载体连接,转化E.coli TG1,构建抗体库.结果后者只需25次连接反应,78次电击转化,既可达到1×1010库容量.结论可以认为新方法具有更高的基因构建效率,并有效提高了抗体库的多样性.
- 是否译文：
- 否
