小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达
Release time:2019-03-10
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Indexed by:
期刊论文
First Author:
胡学军
Co-author:
张志超,包永明,杨青,安利佳
Date of Publication:
2002-06-10
Journal:
中国生物化学与分子生物学报
Included Journals:
ISTIC、CSCD
Document Type:
J
Volume:
18
Issue:
3
Page Number:
287-292
ISSN No.:
1007-7626
Key Words:
小肽多拷贝基因,定向插入,表达载体,EcoT14 Ⅰ,高效表达 multiple copies peptide gene unidirectional insertion high-level expression EcoT14 Ⅰ
Abstract:
介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体;在小肽基因两端分别引进编码Factor Xa和羟胺蛋白切割位点的序列,表达出的融合蛋白可被Factor Xa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽.不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得高效表达.
Translation or Not:
no
