小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达
发表时间:2019-03-10
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- 论文类型:
- 期刊论文
- 第一作者:
- 胡学军
- 合写作者:
- 张志超,包永明,杨青,安利佳
- 发表时间:
- 2002-06-10
- 发表刊物:
- 中国生物化学与分子生物学报
- 收录刊物:
- ISTIC、CSCD
- 文献类型:
- J
- 卷号:
- 18
- 期号:
- 3
- 页面范围:
- 287-292
- ISSN号:
- 1007-7626
- 关键字:
- 小肽多拷贝基因,定向插入,表达载体,EcoT14 Ⅰ,高效表达 multiple copies peptide gene unidirectional insertion high-level expression EcoT14 Ⅰ
- 摘要:
- 介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体;在小肽基因两端分别引进编码Factor Xa和羟胺蛋白切割位点的序列,表达出的融合蛋白可被Factor Xa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽.不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得高效表达.
- 是否译文:
- 否